По ВИЧ/СПИДу
Халикул
27.11.2013
Порядок забор крови для диагностика - ПЦР и СД4 анализов.
Добрый день! Правила взятия, условия хранения и транспортировки биологического материала для определения генетических маркеров ВИЧ методом полимеразной цепной реакции. Для проведения исследования по определению ДНК провируса ВИЧ (качественный тест ПЦР) используют кровь с антикоагулянтом К3ЭДТА. Для проведения исследования по определению вирусной нагрузки ВИЧ может быть использована только плазма. Взятие крови производится из локтевой вены в вакуумную пробирку (вакутейнер), содержащую антикоагулянт К3ЭДТА. После забора пробирка с кровью перемешивается переворачиванием 3-4 раза. Пробирку маркируют с указанием номера пробы, фамилии обследуемого или эпидемиологического номера ВИЧ – инфицированного пациента. Дату и время забора крови указывать обязательно. Пробирки с кровью перед доставкой в лабораторию хранят при температуре +2-+80С. Биологический материал для определения ДНК провируса ВИЧ доставляется в лабораторию не позднее 24 часов с момента взятия крови. Для определения РНК ВИЧ (вирусной нагрузки) биологический материал должен быть доставлен в лабораторию в течение 6 часов с момента взятия крови. Плазма крови должна быть отобрана не позднее 6 часов после забора крови. Для этого пробирку с кровью необходимо центрифугировать при 3000 оборотов в минуту в течение 20 минут. Затем отобрать плазму в количестве не менее 1 мл (отдельным наконечником с аэрозольным барьером) в одноразовую стерильную пробирку объемом 1,5-2 мл. Микропробирка с плазмой маркируется аналогично пробирке с кровью и хранится при температуре +2 - +8 градусов С в течение 5 суток, при температуре минус 700С – длительно. Пробы биоматериала в лабораторию доставляет персонал, прошедший инструктаж, назначенный ответственным за транспортировку приказом по лечебно – профилактическому учреждению. Транспортирование пробирок с кровью и микропробирок с плазмой осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающим элементом или в термосе со льдом при температуре +2 - +8 градусов С. Правила взятия, условия хранения и транспортировки биологического материала для определения показателей иммунного статуса (для проточного цитометра). Необходимо, чтобы образцы крови были правильно взяты и вовремя доставлены в лабораторию. Нарушения, допущенные на этом этапе, могут повлиять на результат исследования и его дальнейшую интерпретацию. Забор крови необходимо осуществлять утром натощак (с момента последнего приема пищи должно пройти не менее 12 часов). В день накануне взятия крови пациенту лучше воздержаться от употребления алкоголя, большого количества пищи, в особенности жирной, а также от чрезмерной физической нагрузки. Забор крови необходимо осуществлять в положении пациента сидя или лежа. Жгут следует снять сразу же после попадания иглы в вену. Длительность наложения жгута не должна превышать 1 минуты. Взятие крови должно осуществляться до проведения диагностических и лечебных процедур. Необходимо не менее 4 мл. крови. При проведении пациенту внутривенных вливаний, пункцию вены для взятия крови необходимо осуществлять на другой руке. При взятии пробы из артериальных или венозных катетеров, канюлю следует промыть изотоническим солевым раствором (физиологическим раствором), первые 5 мл крови следует выбросить, а затем взять пробу. Кровь собирается в вакуумную пробирку, содержащую антикоагулянт. В качестве антикоагулянта лучше всего использовать K3ЭDTA (1,5 +/- 0,15 мг на мл крови). Во избежание образования сгустков необходимо хорошо перемешивать кровь с антикоагулянтом. Перемешивание осуществляется путем переворачивания пробирки не менее 8 раз. Применение миксеров и встряхивание пробирок недопустимо, так как это приводит к гемолизу и получению неверных результатов. Необходимо соблюдать правильное соотношение крови и антикоагулянта. Недостаточное количество крови или переполнение пробирки может привести к искажению результатов иммунофенотипирования. На пробирке с образцом должны быть указаны идентифицирующие данные пациента и точное время забора крови. В сопроводительных документах должны быть указаны фамилия, имя и отчество пациента, возраст, пол, дата и время забора крови. После забора пробирки с кровью хранят притемпературе +18-+25 градусов). Следует избегать замораживания или перегревания образцов, так как нарушение температурного режима может повлиять на результаты иммунофенотипирования. Образцы крови должны быть доставлены в лабораторию как можно скорее, но не позднее 48 часов после взятия крови. Транспортировку проб в лабораторию осуществляют в термоконтейнере (в штативе, в вертикальном положении) при комнатной температуре (+18- +25 градусов), не допуская охлаждения ниже +18 градусов и перегрева выше +25 градусов. На контейнере должна быть маркировка «Не переворачивать, не встряхивать!». Пробы биоматериала в лабораторию доставляет персонал, прошедший инструктаж, назначенный ответственным за транспортировку приказом по лечебно – профилактическому учреждению. с уважением, Алиджон Солиев
Вернуться к списку вопросв